金黄色葡萄球菌毒力因子PSM-α4个基因串联融合表达对人中性粒细胞生物学作用

摘要：

【摘要】酚可溶性调控蛋白(PSM)是一种新发现的金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞外分泌蛋白,为研究其对人中性粒细胞的生物学作用,本研究通过设计linker将其中编码PSM-α蛋白的PSM-α1、PSM-α2、PSM-α3、PSM-α4基因串联,并克隆于pGEX-4T-1中。重组菌经IPTG诱导,重组蛋白以可溶形式高效表达。通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化并用凝血酶切除其GST标签,得到的蛋白作用于正常人的中性粒细胞,通过ELISA检测细胞因子IL-1β及IL-8的含量。结果显示,纯化后蛋白刺激中性粒细胞后,IL-8含量显著升高。结果证明,串联表达后的PSM-α蛋白可以刺激中性粒细胞释放炎性因子,诱导炎症的发生,产生致病作用。
【关键词】可溶性蛋白；人中性粒细胞；炎症；
【基金】国家自然科学基金(31172364);病毒基因工程国家重点实验室开放课题(2011KF05)

引言：

【引言】金黄色葡萄球菌(S.aureus)是人类常见的病原菌，感染后可以引起肺炎、心内膜炎、骨髓炎甚至败血症。由于抗生素滥用，S.aureus 对多种抗生素产生了耐药性。特别是近年来出现的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)，因其直接或间接的与健康医疗设施相关，已成为最重要的公共卫生问题之一。

作者：

刘丽慧

作者单位：

吉林大学畜牧兽医学院