J亚群禽白血病病毒分离株HLJ09SH01株感染性克隆的构建及其致病性研究

摘要：

【摘要】为构建J亚群禽白血病病毒(ALV-J)分离株的感染性克隆并鉴定其对蛋鸡和肉鸡致病力的差异,本研究从黑龙江地区分离鉴定一株ALV-J分离株HLJ09SH01,以其核酸为模板,采用PCR方法分3段扩增其前病毒cDNA,PCR产物经克隆酶切后依次连接,获得一个含有完整ALV-J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pBlue-HLJ09SH01。将其转染DF-1细胞,进行病毒拯救。通过间接免疫荧光、禽白血病抗原试剂盒检测及反转录酶活性试剂盒检验,表明拯救的病毒为ALV-J,命名为rHLJ09SH01。将其分别人工接种11日龄蛋鸡和肉鸡鸡胚,孵育出壳后隔离饲养32周。致瘤性试验结果表明,rHLJ09SH01可以导致57.9%的蛋鸡发生肿瘤,83.3%的肉鸡发生肿瘤。表明该感染性克隆具有亲本病毒的致病性。
【关键词】 J亚群禽白血病病毒；感染性分子克隆；致病性；
【基金】国家自然科学基金(31072146);现代农业肉鸡产业技术体系建设(nycytx-42-G3-01);哈尔滨市科技攻关计划项目(2010AA6AN034)

引言：

【引言】J 亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virussabgroup J) ALV-J 属于反转录病毒中的Al-pharetrovirus家族，其前病毒基因组结构为5'-LTR-leadergag/pol-env-rTM-DR1-E-LTR-3'。1988 年从英国肉鸡中分离到第一株ALV-J 原型病毒HPRS-103，其宿主范围、病毒囊膜干扰和交叉中和试验与A、B、C、D、E 亚群不同，而独立成为一个亚群。HPRS-103 主要引起肉鸡产生以骨髓瘤为主的各种类型肿瘤。1997 年Flady 报道了美国也出现了ALV-J 感染肉鸡群的现象。1999 年，ALV-J 首次在中国肉鸡群中被分离到，随着其在中国鸡群中的传播，宿主范围逐渐扩大，能够感染肉鸡和蛋鸡，并在蛋鸡群中大规模流行。ALV-J 能够导致某些蛋鸡群中60 %的鸡发生肿瘤，并导致超过20 %的被感染鸡死亡，或者导致蛋鸡产蛋率严重下降，临床上引起包括血管瘤、髓细胞瘤、组织肉瘤、成红细胞瘤等多种类型的肿瘤，给养殖业造成一定的经济损失。

作者：

纪晓琳

作者单位：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室；