动物饲料中沙门氏菌环介导等温扩增(LAMP)快速诊断方法的建立

摘要：

【摘要】根据GenBank公布的沙门氏菌高度保守的fimY蛋白基因序列,利用Primer explorer V4软件设计4条针对沙门氏菌fimY基因的特异性引物,通过对Mg2+浓度、dNTP浓度、反应温度、反应时间、特异性、敏感性、重复性和稳定系及符合率等方面,优化LAMP各种反应条件,建立针对沙门氏菌LAMP快速诊断方法。结果表明,该方法具有较强的特异性;比PCR检测方法敏感性高100倍,对沙门氏菌的最低检出量为6.2CFU/mL;对24份样品的3次检测结果与国标法完全一致。证明建立的针对fimY蛋白基因的LAMP检测方法操作简便,特异性强,敏感性高,适用于现场检测。
【关键词】沙门氏菌；饲料；环介导等温扩增；快速诊断；

引言：

【引言】沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一，由沙门氏菌引起的食物中毒屡居首位（蔡宝祥，２００４）。动物性产品中含有多种丰富的营养成分，非常适宜于沙门氏菌的生长繁殖，人们一旦摄入了含有大量沙门氏菌的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素的作用下发生食物中毒（桑杰等，２００６；Ｖｕｇｉａ等，２００４）。各种饲料中均可发现沙门氏菌，尤其是动物性饲料（如鱼粉）常见（Ａｄａｋ等，２００２；Ｖｏｅｔｓｃｈ等，２００４）。鉴于沙门氏菌对人类健康的严重危害，目前世界各国政府对动物性饲料中沙门氏菌的限量标准均制定出非常严格的规定，对动物性饲料中沙门氏菌的规定均为不得检出，为所有微生物限量标准中的最严格级（王章云，１９９９）。

作者：

孙园园；赵鹏

作者单位：

镇江出入境检验检疫局；