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定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立

中国畜牧兽医
China Animal Husbandry & Veterinary Medicine
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摘要:
【摘要】 本研究根据GenBank中登录的剂量敏感的翼状螺旋/叉头转录因子2(forkhead transcription factor 2,FOXL2)设计引物,构建包含FOXL2基因cDNA片段的质粒,作为中国荷斯坦牛FOXL2基因mRNA定量检测的标准品,建立了FOXL2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法特异性好,检测灵敏度达101拷贝,线性范围为101~106拷贝,阈值循环数(Ct)与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=0.998689),扩增效率高(E=99.62%),可以作为检测牛FOXL2基因mRNA定量检测方法。
【关键词】 FOXL2基因; 荧光定量PCR; TaqMan探针; 标准曲线;
引言:

【引言】动物的性别与许多重要的经济性状有直接关系,奶牛场希望拥有更多母牛;而牛肉生产中,公犊因为生长速度、屠宰率、胴体重等性状优势却更受欢迎。性别性状在畜牧业中具有重要价值,调控生产中性别比例具有重要意义(文国艺,2004;贾敬敦,2006)。然而,性别发育是一极其复杂的过程,是包括多种基因参与的级联反应过程。大量研究结果表明,哺乳动物性别形成过程表现为以SRY 基因为主导、多基因共同参与协调表达的调控串模式(McElreavey等,1993)。最近人们发现还有其他基因能起到类似SRY 基因的作用,如翼状螺旋/叉头转录因子2(forkhead transcription factor 2,FOXL2)基因就是一个良好的候选者(Uhlenhaut等,2006)。雄性和雌性性别决定路径可能都依赖于显性作用,SRY通过上调SOX9表达启动雄性通路;FOXL2或DAX1通过抑制SOX9表达启动雌性途径(Dewing等,2006)。

作者:
徐超;杜卫华;赵家平
作者单位:
中国农业科学院特产研究所; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

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