牛巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法的建立

摘要：

【摘要】为建立牛巴贝斯虫(B.bovis)的TaqMan实时荧光PCR检测方法,本研究根据GenBank中B.bovis的18S rRNA基因保守序列,设计引物和TaqMan探针,通过优化反应体系,建立检测B.bovis的实时荧光PCR方法。试验结果表明:实时荧光PCR对靶基因的最低检测值为1.31×101copies/μL,比常规PCR的敏感性高1 000倍;而且与牛的其他血液原虫无交叉反应;组内及组间重复性试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性;在23份被检样品中,实时荧光PCR和常规PCR的检出率分别为52.17%和30.43%。该检测方法的建立为B.bovis的检测提供了一种快速、敏感、特异的技术手段。
【关键词】牛巴贝斯虫；实时荧光PCR； TaqMan探针；检测；
【基金】国家自然科学基金(30960282);国家自然科学基金会(NSFC)-新疆联合基金(U1170301)

引言：

【引言】牛巴贝斯虫(Babesia bovis)是一种蜱媒血液原虫，牛属动物感染后，出现发热、贫血、血红蛋白尿、共济失调等症状，严重时引起死亡，给畜牧业造成严重经济损失。B. bovis 与双芽巴贝斯虫(B.bigemina)、牛环形泰勒虫(Theileria annulata)等梨形虫(牛焦虫)常常混合感染牛只，严重危害养牛业的健康发展，梨形虫的混合感染和隐性感染对牛血液原虫病的防治带来了一定困难。

作者：

刘启生；王振宝；王真；哈森

作者单位：

新疆农业大学动物医学学院；伊犁出入境检验检疫局；