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绵羊肝片吸虫谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与序列分析

中国畜牧兽医
China Animal Husbandry & Veterinary Medicine
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摘要:
【摘要】 本研究扩增肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因,并进行同源性分析。根据GenBank发表的部分Fh GST基因序列设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出Fh GST基因完整的开放阅读框(openreading frame,ORF),测定序列,使用分子生物学软件进行同源性分析。获得Fh GST基因全长682bp,编码218个氨基酸,与澳大利亚分离的肝片吸虫GST同源性较高,与大片吸虫和卫氏并殖吸虫的GST也有较高的同源性。不同虫株GST基因具有较高的同源性,因此Fh GST蛋白不适合用作诊断抗原,但由于其存在交叉反应,GST基因作为分子疫苗的候选基因具有重要意义。肝片吸虫GST基因的克隆,为进一步研究GST蛋白的功能和作用奠定了基础。
【关键词】 肝片吸虫; GST基因; 序列分析;
引言:

【引言】肝片吸虫病(fasciolosis)是由肝片吸虫寄生于牛、羊等反刍动物肝脏胆管中,引起的急性或慢性肝炎和胆管炎,并伴发全身性中毒现象和营养障碍的一种吸虫病。该病遍及世界各地,牧区家畜发病率较高,牛、山羊、绵羊、马、骆驼等易感,其中牛、羊肝片吸虫病感染率可达33% ~79% (Dalton 等,2003),是中国危害最严重、覆盖面最广范的反刍兽寄生虫病之一(赵辉元,1996;Gaasenbeek 等,2001)。肝片吸虫病在给畜牧业带来巨大经济损失的同时,还能够感染人,威胁人们的身体健康。谷胱甘肽硫转移酶(GST)在寄生虫疫苗研究中有重要意义。GST是广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物中,与细胞解毒和许多生理及生物异源物质排泄有关的一种多功能酶家族(Gaasenbeek等,2001)。GST存在于所有蠕虫成虫的体内,在蠕虫的代谢中起着非常重要的作用,是蠕虫主要解毒酶之一(Chemale等,2006)。研究结果表明,GST 分布于肝片吸虫成虫的实质和皮层及肠道细胞的表层。Spithill等(1997)用肝片吸虫分泌排泄物中提取的GST免疫动物,取得了较好的抗肝片吸虫感染的免疫保护效果。

作者:
冉旭华;闻晓波
作者单位:
黑龙江省农业科学院博士后科研工作站; 东北林业大学博士后科研流动站;

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