猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化条件的优化

【引言】乳酸菌为人及动物体内正常菌群的重要成员，以乳酸菌作为表达外源保护性抗原基因的受体菌株，就可将乳酸菌的生物学功能和外源功能抗原基因的特异性免疫相结合，所以应用乳酸菌携带外源基因作为黏膜免疫的口服疫苗将具有良好的应用前景。乳酸菌的遗传转化常应用电转化的方法，电转化（ｅｌｅｃｔｒｏ－ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）是利用瞬间高压打击细胞膜，使之形成孔洞，使ＤＮＡ 分子得以进入细胞（Ｗａｎｇ等，２００８）。然而影响电转化效率的因素很多，本试验以嗜酸乳杆菌作为受体菌株，将猪源Ａ组轮状病毒ｐＷ４２５ｅｔ－Ｖｐ４重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌，对影响电转化效率的各因素进行研究，确立提高转化效率的最佳条件，为猪源Ａ 组轮状病毒Ｖｐ４基因工程乳酸菌疫苗的制备及应用奠定基础。