土曲霉洛伐他汀合成调控基因lovE的克隆与表达

摘要：

【摘要】目的克隆表达土曲霉洛伐他汀合成调控基因lovE,为研究lovE蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体pET21b(+)构建lovE原核表达质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白。结果构建了pET-lovE原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得6×His-lovE融合蛋白,蛋白纯度在90%以上。结论原核表达可获得lovE蛋白,为lovE蛋白的生物学功能研究奠定了基础。
【关键词】土曲霉；洛伐他汀；调控基因；亲和层析；

引言：

【引言】洛伐他汀( lovastatin，也称mevinolin、monacolinK) 是羟甲基戊二酰辅酶A( HMG-CoA) 还原酶抑制剂，是治疗高胆固醇血症的首选药物，它能阻止动脉硬化发展，减少心肌梗死等危险。洛伐他汀的主要产生菌为丝状真菌土曲霉( Aspergillus terreus)和红曲霉( Monascus) 。土曲霉洛伐他汀合成酶基因簇包括lovA-lovG、lovI 和lovA 等基因。lovE 是土曲霉洛伐他汀生物合成的调控基因，编码GAL4 类转录因子，其氨基酸序列中半胱氨酸富集的DNA 结合区域表明含有Zn2Cys6型锌指结构域。

作者：

朱碧云；黄欣；刘宝意

作者单位：

广东药学院生命科学与生物制药学院；